細胞培養(yǎng)支原體污染防控全攻略——從預防到處理的系統化指南
2025-11-21
細胞培養(yǎng)支原體污染防控全攻略——從預防到處理的系統化指南一、支原體污染的危害與識別隱性威脅:支原體無細胞壁,可穿透0.22μm濾膜,常規(guī)抗生素(如青霉素)無效,常導致細胞生長緩慢、形態(tài)異常(如“空泡化”)、實驗重復性差,甚至基因表達譜改變。快速檢測:熒光染色法:使用染色,支原體DNA在紫外光下呈“星點狀”熒光。PCR檢測:針對支原體16SrRNA基因設計引物(如通用引物),靈敏度達10CFU/mL,3-4小時出結果。培養(yǎng)法:將細胞上清接種于支原體培養(yǎng)基,28℃培養(yǎng)14天,觀察...
細胞治療血清的保存和活性維護指南
2025-11-20
細胞治療血清的保存和活性維護指南細胞治療血清保存流程與關鍵要點1.溫度分級精準管理長期保存:需儲存于-20℃至-80℃低溫環(huán)境,優(yōu)先選擇-70℃超低溫冰箱以大化活性保留,保存期限可達數年。血清結冰體積膨脹約10%,分裝時須預留10%空間(如50mL管裝45mL),避免凍裂污染。短期使用:4℃冷藏不超過1個月,超期易激活補體系統,導致免疫細胞(如T細胞、巨噬細胞)非特異性凋亡。2.分裝與解凍規(guī)范操作分裝策略:按單次用量分裝為10-50mL小份,標注“批次+日期+溫度”,避免反復...